本文作者:物华草木

山茱萸、五味子配伍前后马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量测定山茱萸

物华草木 5个月前 ( 10-13 ) 4991 抢沙发
山茱萸、五味子配伍前后马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量测定山茱萸摘要: 目的研究山茱萸、五味子配伍前后主要成分的含量变化。方法采用高效液相色谱法比较单煎、合煎和单煎配伍前后马钱苷、没食子酸和五味子甲素的含量变化。结果当配伍比例较低(4:4)时,...

山茱萸、五味子配伍前后马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量测定山茱萸

目的研究山茱萸、五味子配伍前后主要成分的含量变化。方法采用高效液相色谱法比较单煎、合煎和单煎配伍前后马钱苷、没食子酸和五味子甲素的含量变化。结果当配伍比例较低(4:4)时,五味子促进山茱萸中马钱苷的溶出。随着五味子配伍比例的增加,合煎液中没食子酸和五味子甲素的百分含量呈线性下降,均低于单煎液。单煎合煎液中这三种成分的含量高于同比例合煎液。结论山茱萸和五味子的配伍对两种药物主要成分的溶出有很大影响,主要发生在煎煮过程中。

山茱萸是一种中药,是山茱萸的简称。山茱萸科植物。《神农本草经》首次见到的山茱萸干成熟果肉,具有补肝肾、收敛固本的功效。五味子是五味子干燥成熟的果实。)Baill。俗称“五味子”,因其五味。五味子是一种酸温的产品,具有收敛涩涩、益气生津、补肾宁心的功效[2]。两药有酸涩作用,同时又有滋补肝肾的作用,配合力强。临床上,两种药物用于治疗老年人频繁尿失禁、多汗、气阴两虚[3]、视物模糊、头晕等疾病,常取得良好效果[4]。

山茱萸中的主要有效成分是环烯醚萜类和有机酸。五味子中的主要有效成分是木脂素和有机酸。目前还没有关于该组药物配伍的研究报告。从化学角度出发,选择马钱苷、没食子酸和五味子甲素,探讨山茱萸和五味子的配伍机制。

本实验采用不同比例的山茱萸和五味子,研究了单煎、共煎和单煎混合过程中药材的溶出行为,明确了两种药材主要成分的变化规律和明显的相互作用。从物质变化的角度揭示了山茱萸与五味子配伍的科学内涵,为我国中药配伍理论的进一步研究提供了物质基础。

1设备和方法

1.1仪器和试剂

2695沃特世高效液相色谱系统(美国马萨诸塞州米尔福德);二极管阵列探测器;沃特斯自动进样器。乙腈、甲醇和乙酸色谱纯(美国费希尔公司);其他试剂为分析纯(北京化工厂),水为超纯水(18.2 m cm),0.45微米滤膜(美国安捷伦公司)。山茱萸和五味子由吉林药材有限公司提供,长春中医药大学王淑敏教授鉴定。马钱苷、没食子酸和五味子甲素购自中国药品生物制品检定所进行含量测定。

1.2方法

1.2.1样品液体制备的水提取方法。

单煎:称取一定量的山茱萸和五味子,放入烧杯中,加入200毫升蒸馏水,浸泡30分钟,保持微沸并保持时间,煎煮两次,每次60分钟,合并滤液,减压浓缩,保持体积不变,即得山茱萸和五味子单煎液。

共煎:准确称取山茱萸4g,分别加入五味子1、2、4、6、8、12 g,按照单煎的条件得到相同的汤剂。

单煎:分别取山茱萸单煎液和五味子单煎液,按原料药等浓度折算,制成山茱萸五味子433602单煎液合并液。

1.2.2 chro

马钱苷:y=2.50e006x-1.19e005,r=0.9998,线性范围0.52~2.60g g。

没食子酸:Y=5.84e 006X 2.36e 004,r=0.9999,线性范围0.112 ~ 0.56g/g。

五味子醇甲:Y=1.30e 007X 2.11e 005,r=0.9997,线性范围0.12 ~ 0.6g/g。

1.3.2精密实验

取同一样品溶液,连续进样5次。三个色谱峰的保留时间相对标准偏差分别为0.15%、0.23%、0.18%,峰面积相对标准偏差分别为0.35%、0.33%、0.38%。

1.3.3稳定性实验

取同一样品溶液,每4h进样一次,测定五次。三个色谱峰的保留时间相对标准偏差分别为1.12%,1.36%,1.28%,峰面积相对标准偏差分别为1.54%,1.13%,1.27%。

1.3.4重复性实验

将山茱萸和五味子的单煎液按照4:2合并,得到5个单煎液。根据上述方法,三个色谱峰的保留时间相对标准偏差分别为1.09%、1.15%、0.97%,峰面积相对标准偏差分别为2.58%、2.80%、2.61%。

1.3.5样品添加回收率实验

准确称取5个样品,加入一定量的马钱素、没食子酸和五味子醇甲作为标准品,按照样品分析方法处理,平行测量两次。三种组分的平均回收率分别为100.58%,99.97%,100.14%,相对标准偏差分别为2.48%,2.63%,2.37%。

2.结果

按照“1.2”的方法,测定了山茱萸和五味子不同配伍比例样品中马钱苷、没食子酸和五味子甲素的含量。结果如表1所示。从表1可以看出,五味子不含马钱苷和没食子酸成分,这两种成分的测定结果均来源于山茱萸中的成分;山茱萸中不含五味子甲素成分,测定结果数据均来自五味子。山茱萸、五味子配伍时,这三种成分的百分含量与配伍比例的关系见直方图2。表1各样品中马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量(略)

从表1和图2可以看出,随着五味子配伍比例的增加,马钱素的溶出度呈下降趋势。当配伍比例较低(4:4)时,合煎液中马钱苷的溶出度大于山茱萸单煎液,变化不大。当配伍比例较高时,马钱苷含量迅速下降23%。随着五味子配伍比例的增加,合煎液中没食子酸的百分含量呈线性下降,低于山茱萸单煎液。数据波动范围小于其他两个分量。五味子醇甲的含量变化趋势与没食子酸相似,但下降幅度较大。按照42的配伍比例制备的山茱萸、五味子单煎液中这三种成分的含量均高于同比例。

以上结果表明,山茱萸和五味子的配伍对有效成分的溶出有很大影响。当配伍比例44时,五味子能提高山茱萸中马钱苷的含量。五味子抑制山茱萸中没食子酸的溶出,山茱萸在各配伍比例下也抑制五味子中五味子醇甲的溶出。山茱萸和五味子在共煎过程中的相互作用可以通过先煎煮单味药材来消除,说明山茱萸和五味子的配伍主要影响煎煮过程中的成分。实验过程中,合煎液或单煎液合煎液均未发现沉淀,所以成分含量变化的原因可能是山茱萸和五味子都是酸味药,有机酸和木脂素的部分成分竞争溶出,抑制了溶出,或者形成了一些新化合物,降低了成分含量。

3.讨论

在分析方法中,分别对流动相的组成和洗脱方法进行了考察和优化。梯度洗脱可以同时获得三个组分的色谱峰,但样品溶液分离效果差,峰形也差。考虑到含量测定的准确性,最终选择了两种等度洗脱,使得三种组分分离良好,测定快速。

研究了山茱萸汤和五味子汤配伍中主要成分的含量变化规律。结果表明,当配伍比例较低(44)时,合煎液中马钱苷的溶出量大于单煎液,当配伍比例较高时,马钱苷含量迅速下降。随着五味子配伍比例的增加,合煎液中没食子酸和五味子甲素的含量呈线性下降,低于山茱萸单煎液。按照42的配伍比例制备的山茱萸、五味子单煎液中这三种成分的含量均高于同比例。

先将单味药材煎煮,再合并单味汤剂。与同比例的合煎相比,可以看出山茱萸和五味子的配伍主要在煎煮过程中影响成分含量。

[参考文献]

[1]赵有仁。引用该论文王志平,王志平,王志平.中草药,1987,10 (5): 51.

李晓光,罗焕民。引用该论文王志平,王志平,王志平.中华中医杂志,2003,28 (12): 1120。

王秀玲邵峰峰。引用该论文王志平,王志平,王志平.河北中医杂志,2004,26 (12): 919。

李治文张慧芳。引用该论文王志平,王志平,王志平.时珍中医研究,1996,7 (4): 198。

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